牛羊布病快速檢測卡采用膠體金免疫層析試驗(GICA)原理制成,樣本加入到加樣孔后與膠體金標記物一起沿層析膜移動,若樣本中存在布病抗體則與膠體金標記物及檢測線上的抗原結合而顯示紫紅色,若樣本中不存在布病抗體則不產生顏色反應。
牛羊布病快速檢測卡樣本要求:
1.本檢測卡僅適用于檢測牛羊血清/全血/奶樣。
2.血清:按常規(guī)方法抽取2-3ml血液置潔凈干燥的試管中,靜置約1小時待血液凝固后于4000轉/分鐘離心10分鐘(也可將血液靜置約2小時,待血液凝固自然析出血清),分離血清。要求血清清亮,無溶血、無污染。血清樣本短期可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
3.全血:采集新鮮抗凝全血當天使用,未加抗凝劑的全血現(xiàn)采現(xiàn)用。
4.奶樣:采集新鮮奶樣當天使用。
牛羊布病快速檢測卡試驗方法:
1.用配套吸管吸取已準備好的樣本,垂直而緩慢的滴加1滴血清或者2滴全血或者1滴奶樣到樣本稀釋液中(注意:該步驟很關鍵,樣本切不可多加),混勻后待用。
2.撕開檢測卡鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、潔凈的臺面上,使用袋內吸管取2-3滴(約60ul)步驟1得到的待測液到加樣孔內。(若有微量移液器,可先加3ul血清或6ul全血,再滴加兩滴稀釋液)。
3.室溫下放置10-15分鐘判斷結果,15分鐘后結果只作參考。
結果判斷
1.陰性:在觀察孔內,只有對照線區(qū)(C)出現(xiàn)一條紫紅色線。
2.陽性:在觀察孔內,檢測線區(qū)(T)及對照線區(qū)(C)同時出現(xiàn)紫紅色線。抗體滴度越高,檢測線(T)顏色越深。
3.失效:在觀察孔內,對照線區(qū)(C)不出現(xiàn)紫紅色線。
【試驗結果的解釋】
1.當被檢樣本檢測線(T)處無明顯色帶出現(xiàn),說明被檢測樣本中沒有布病抗體。
2.當被檢樣本檢測線(T)處有明顯色帶出現(xiàn),則該樣本中含有布病抗體。